郭宏记1，刘少英2(1.浙江大学 物理系，浙江 杭州 310027；2.浙江大学 心理系，浙江 杭州 310027)摘要：持变概率法,是一种统计一维序列持续变化概率的方法，可用于统计核酸序列碱基交替变化情况，通过此方法得出：1）核酸序列中的持变概率与持变次数呈指数关系变化；2）人类各染色体的持变指数有一定的稳定性，受个体、测序方向的影响较小；3）持变指数具有特征性，核酸序列中产生的持变指数与随机序列中产...

一种通用高效的复杂载体构建的新方法A Universal High-throughput Novel Method of Constructing the Vectors<<遗传 >>2006年02期陆云华 , 马立新 , 蒋思婧 , LU Yun-Hua , MA Li-Xin , JIANG Si-Jing 文章报道了一种简便、通用、高效的复杂载体构建方法.此法是在PCR引物设计时,在目的片段5&prime;端加上随机设计的接头,利用PCR克隆目的片段,再用T4 DNA聚合酶3&prime;&rarr;5&prime;外切酶活性处理PCR克...

Preparation of Single-Stranded Tailed Templates for 454 Sequencing Citation: Ruby et al., Cell 127: 1193-1207 (2006)

1.The importance of DNA cloning: Current DNA technology is based on two different approaches: a. Specific amplification (DNA cloning) which involves cell-based DNA cloning (involving a vector/replicon and a suitable host cell) and in vitro DNA cloning (PCR) b. Molecular hybridization where the DNA fragment of interest is specifically detected using a mixture of differ...

Southern Blotting of Genomic DNA- 1. Digest DNA:&bull; 1.5 &mu;g DNA in a 25 &mu;I reaction containing BSA&bull; 3 to 5 units for 5 to 3 hours (aim for 10-fold overdigestion; remember many enzymes will not survive well for more than 3 hr).&bull; Also prepare molecular weight standard (Lambda plus HindIII); avoid plasmid-derived markers (1 kb ladder, etc.) since it might c...

Plasmids are small double-stranded DNA pieces of DNA that exist outside the chromosome of the cell in which they are located. Almost all plasmids are circular. They contain a small number of genes, which can include genes that make cells resistant to antibiotics. Plasmids are used extensively in cloning DNA. You insert some foreign DNA into the plasmid DNA, and then infect ...

ALKALINE LYSIS DNA PREP (E. COLI)

Abstract: Delta-12 desaturases are involved in the conversion of oleic acid to linoleic acid in plant. Based on the conserved oligo amino acid residues of the published delta-12 desaturase genes from other higher plant species, a cDNA fragment was amplified by RT-PCR (reverse transcriptase-polymerase chain reaction) from the total RNA of immature maize embryos. According to...

IntroductionExtraction and purification of plasmid DNA from E.coli can be performed on a small scale,where DNA is extracted from just 1-2 ml of bacterial culture (mini-prep), or from much larger volumes (100 ml &ETH; maxi-prep; 1 L &ETH; giga-prep). The procedure requires cell lysis to release DNA (and other cell components including RNA and protein) and then DNA purificati...

IntroductionWe will express recombinant proteins in COS or HEK293 cells Ð see table below for further details. COS (HEK293) cells will be provided at 50-70% confluency. We will use three different transfection procedures/reagents, DEAE dextran, calcium phosphate and Effectene™.

IntroductionThe aim of this protocol is to describe the sub-cloning procedure Ð the techniques used to take a DNA fragment from one plasmid and transfer it to another.

摘要：植物分子生物学实验中，用于从植物组织分离和纯化基因组DNA 的方法有很多种。在一些大规模的作物育种项目和在群体中进行转基因遗传分析时需要逐个操作大量的样本。本文介绍了一套全自动分离植物总基因组DNA 的方案，采用了PromegaWizard&reg; 96 DNA 植物基因组磁珠分离试剂盒和Eppendorf epMotion&reg; 5075 LH 自动移液工作站。方案中测试了各种植物的叶片和种子样品，对分离得到的基因组DNA 进行...

易庆平1 ,罗正荣2 ,张青林2 (1. 荆楚理工学院生物工程分院,湖北荆门448200 ;2. 华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,湖北武汉430070)摘要　归纳植物DNA 提取各个环节,同时对DNA 提取过程中的常见问题、原因及应对策略作简要的分析。关键词　植物;总基因组DNA;提取;纯化;进展中图分类号　Q781 　　文献标识码　A 　　文章编号　0517 - 6611(2007) 25 - 07789 - 03Advances of Genome DNA Extracti...

实验目的了解碱法提取质粒的原理；掌握碱法提取质粒的方法。实验原理质粒是一种细菌染色体外的、具有自主复制能力的、共价闭合环状超螺旋结构的小型DNA分子。碱裂解法提取质粒是实验室常用的方法。这种方法是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。

Bacterial Transformation IntroductionTransformation is a technique to introduce DNA into bacterial cells. There are many variations on a common theme, but the key points are listed below. Check details with supplier of competent bacteria and note that variations in timings and volumes will vary with application and bacterial strain.

马志杰1(生命科学与技术学院遗传育种与繁殖专业 四川成都 610041)摘要哺乳动物体细胞克隆技术的成功是生物高新技术的重大突破具有划时代里程碑的作用本文介绍了哺乳动物体细胞克隆技术的基本环节关键技术及研究现状并就其意义和存在的问题作了概述然后对其发展前景作了展望关键字: 哺乳动物 体细胞 重组胚胎 克隆

朱海燕, 邬玲仟3, 梁德生, 夏家辉(中南大学湘雅医院医学遗传学国家重点实验室, 湖南长沙410078)摘要:假性肥大型进行性肌营养不良(DMD/ BMD) 是一类发病率较高的X 连锁隐性遗传病。DMD 基因庞大,突变机制复杂,随着分子生物学的进展,对DMD 基因及其所编码dystrophin 蛋白的认识不断深入,探索更简便、准确、经济的基因突变检测技术成为目前对DMD 研究的热点,本文着重对DMD 基因、突变与表型关系的研究进展,以...

陈志坚,彭孝军3(大连理工大学精细化工国家重点实验室,辽宁　大连　116012)摘要:DNA(脱氧核糖核酸) 荧光标示技术是分子生物学中的一项重要技术,普遍应用于DNA 测序、寡核苷酸杂交、荧光PCR 等领域。本文综述了二十世纪八十年代以来DNA 荧光标示方法(手动标示、自动标示) 、标示试剂及其研究进展,介绍了DNA 荧光标示的一些新的应用,并结合我国实际提出了有益的建议。关键词:DNA;荧光标示;寡核苷酸;标示试剂

唐曙明　何林　周克元　　【关键词】　核酸; 　分离与纯化; 　核酸提取　　核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。

唐曙明　何林　周克元　　【关键词】　核酸; 　分离与纯化; 　核酸提取　　核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。